- پنج شنبه ٢٢ آذر ١٣٩٧
صفحه اصلی > مقالات 


  چاپ        ارسال به دوست

منیع:بنیان

میکروRNAی29(miR-29) فاز اولیه فرایند بازبرنامه ریزی را با هدف قرار دادن آنزیم های فعال دمتیله کننده DNA و سیگنالینگ Wnt مختل می کند

با این حال، بسیاری از مکانیسم هایی که خود منجر به بازبرنامه ریزی هسته ای می شوند مجهول باقی مانده اند. در این جا، ما نقشmiR-29 را طی بازبرنامه ریزی با جزئیات بیشتر آنالیز کرده ایم. بنابراین، ما بیان miR-29 طی بازبرنامه ریزی فیبروبلاست های ترانسداکت شده با لنتی ویروس OKS و وکتورهای OKSM ارزیابی کردیم و نشان دادیم که اضافه کردن c-MYC به کوکتیل فاکتور بازبرنامه ریزی سطح بیان miR-29 را کاهش می دهد. علاوه براین، ما دریافتیم که ترانسفکشن pre-miR29a قویا تشکیل کلونی های GFP+ القا شده با OKS‌را در سلول های MEF مشتق از موش Oct4-eGFP reporter کاهش می دهد. در حالی که anti-miR29a اثرمخالفی را نشان داد. علاوه براین، ما اجزای دو مسیر را مطالعه کردیم که برای بازبرنامه ریزی مهم هستند و شامل اهداف miR-29 هستند: دمتیلاسیون DNA فعال و مسیر Wnt. ما نشان دادیم که مهار Tet1، Tet2‌و Tet3 و هم چنین فعال سازی پیام رسانی Wnt منجر به کاهش کارایی بازبرنامه ریزی می شود. علاوه براین، ترانسفکشن pre-miR29 منجر به بیان افزایش یافته هدف رونویسی بتا کتنینی sFRP2‌و افزایش فعالیت پروموتور TCF/LEF می شود. در نهایت ما گزارش کردیم که GSK-β یک هدف مستقیم miR-29‌در سلول های MEF است. در مجموع، یافته های ما منجر به درک مکانیسم های مولکولی می شود که به موجب آن ها miR-29 روی بازبرنامه ریزی اثر می گذارد.

Stem Cell Res. 2016 Dec 19;19:21-30. doi: 10.1016/j.scr.2016.12.020. [Epub ahead of print]

MicroRNA-29 impairs the early phase of reprogramming process by targeting active DNA demethylation enzymes and Wnt signaling.

Fráguas MS1, Eggenschwiler R2, Hoepfner J3, Schiavinato JL4, Haddad R5, Oliveira LH6, Araújo AG7, Zago MA8, Panepucci RA9, Cantz T10.

Abstract

Somatic cell reprogramming by transcription factors and other modifiers such as microRNAs has opened broad avenues for the study of developmental processes, cell fate determination, and interplay of molecular mechanisms in signaling pathways. However, many of the mechanisms that drive nuclear reprogramming itself remain yet to be elucidated. Here, we analyzed the role of miR-29 during reprogramming in more detail. Therefore, we evaluated miR-29 expression during reprogramming of fibroblasts transduced with lentiviral OKS and OKSM vectors and we show that addition of c-MYC to the reprogramming factor cocktail decreases miR-29 expression levels. Moreover, we found that transfection of pre-miR-29a strongly decreased OKS-induced formation of GFP+-colonies in MEF-cells from Oct4-eGFP reporter mouse, whereas anti-miR-29a showed the opposite effect. Furthermore, we studied components of two pathways which are important for reprogramming and which involve miR-29 targets: active DNA-demethylation and Wnt-signaling. We show that inhibition of Tet1, Tet2 and Tet3 as well as activation of Wnt-signaling leads to decreased reprogramming efficiency. Moreover, transfection of pre-miR-29 resulted in elevated expression of β-Catenin transcriptional target sFRP2 and increased TCF/LEF-promoter activity. Finally, we report that Gsk3-β is a direct target of miR-29 in MEF-cells. Together, our findings contribute to the understanding of the molecular mechanisms by which miR-29 influences reprogramming.

PMID: 28038351


٠٨:١٩ - چهارشنبه ٢٩ دی ١٣٩٥    /    شماره : ٨١٥    /    تعداد نمایش : ٣٣٠


نظرات بینندگان
این خبر فاقد نظر می باشد
نظر شما
نام :
ایمیل : 
*نظرات :
متن تصویر:
 

خروج




صفحه اصلیاخبار و تازه هامقالاتمجلاتتماس با مادرباره ما
طراحی شده توسط: آریانیک